北京立博泰業(yè)科技有限公司
北京立博泰業(yè)科技有限公司
| 參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)其他
所 在 地北京市
紡織服裝機械網(wǎng)采購部電話：0571-88918531
QQ:2568841715
聯(lián)系方式：查看聯(lián)系方式
更新時間：2025-01-06 21:20:06瀏覽次數(shù)：39次
聯(lián)系我時，請告知來自 紡織服裝機械網(wǎng)（貨號：WLB5001）原理概述：本試劑盒基于一種常溫恒溫核酸快速擴增技術：在常溫恒溫下，重組酶和引物形成蛋白/單鏈核苷酸的復合體Rec/ssDNA，在輔助蛋白和單鏈結(jié)合蛋白SSB的幫助下，侵入雙鏈DNA模板
（貨號：WLB5001）
原理概述：
本試劑盒基于一種常溫恒溫核酸快速擴增技術：在常溫恒溫下，重組酶和引物形成蛋白/單鏈核苷酸的復合體Rec/ssDNA，在輔助蛋白和單鏈結(jié)合蛋白SSB的幫助下，侵入雙鏈DNA模板；在侵入位點形成D-loop區(qū)域，并開始對DNA雙鏈進行掃描；待找到與引物互補的目的區(qū)域后，復合體Rec/ssDNA解體的同時，聚合酶也結(jié)合到引物的3’末端，開始鏈的延伸。
產(chǎn)品特點：
本試劑盒具有靈敏度高、特異性強、反應時間短（僅需30 mins）等優(yōu)點。金屬浴、水浴鍋等即可進行反應操作，無需購買PCR擴增儀等價格高昂的設備。
引物設計：
建議使用長度在30-35 bp的引物，引物過短會影響擴增速度和檢測靈敏度；引物設計避免形成二級結(jié)構(gòu)而影響擴增；擴增子長度建議在150-300 bp，通常不超過500 bp。
試劑盒組成：
| 組成 | 含量 |
| C buffer | 1mL×2管 |
| L buffer | 500 μL×1管 |
| P-core | 1.2 mL×1管 |
| B buffer | 300 μL×1管 |
| 使用說明書 | 1份 |
試劑盒儲存：
運輸條件：低溫運輸；
儲存條件：儲存溫度 ≤ -20 oC，避光保存，避免重壓，避免反復凍融。
產(chǎn)品有效期：6個月。
操作步驟：提前將試劑盒所需組分取出，冰上或低溫下融化（C buffer可室溫融化），震蕩混勻。
1) 向無菌0.2mL PCR管中加入20 μL C buffer、5 μL L buffer；
2) 加入2 μL上游引物、2 μL下游引物；
3) 加入1.5μL dNTPs；
4) 向反應管中加入12 μL P-core（步驟1~4可以混合后再分裝至反應管中）；
5) 向反應管中加入2.5μL ddH2O和2.5 μL核酸模板（可根據(jù)核酸濃度和實驗需求調(diào)整加入的核酸模板體積，并相應調(diào)整加入的ddH2O體積，至模板與ddH2O總體積為5 μL）；
6) 最后向反應管中加入2.5 μL B buffer并充分混合（加入B buffer反應立即被啟動）；上下顛倒混勻后（請務必保證充分混勻），將反應液甩（或快速離心）至管子底部，然后立即將反應管放入恒溫設備中：37~42 oC恒溫孵育，時間30 mins；
7) 反應結(jié)束后，如需進行瓊脂糖凝膠電泳檢測，請加入50 μL酚/氯仿，1:1抽提反應液，12000 rpm離心5 mins，取5 μL上清進行電泳檢測。
體系配制
| 組分 | 體積（μL） |
| C buffer | 20
5 |
| L buffer | |
| P-core | 12 |
| dNTPs(10 mM) | 1.5 |
| 下游引物(10 μM) | 2 |
| 下游引物(10 μM) | 2 |
| ddH2O和DNA模板 | 5 |
| B buffer | 2.5 |
| 總體積 | 50 |
|
注意事項：
您感興趣的產(chǎn)品PRODUCTS YOU ARE INTERESTED IN
紡織服裝機械網(wǎng) 設計制作，未經(jīng)允許翻錄必究 .? ? ?
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
